定制合成 Custom synthesis
聯系方式 Contact Us
多肽合成主要有兩種方法:化學合成多肽和生物合成多肽。
化學合成主要通過氨基酸和氨基酸之間的縮合來進行。在生成含有特定順序的多肽時,由于多肽合成原料中含有單一的氨基酸,其官能度大于2,所以在合成多肽時,應暫時保護不需要反應的基團,然后才能進行成肽反應,從而保證多肽合成目標產物的定向性。多肽的化學合成分為液相合成和固相合成。
多肽液相生成主要分為兩種策略:逐漸合成和片段組合。逐漸生成簡單快捷的多肽片段,可用于合成各種生物活性多肽片段。片段組合法主要包括天然化學連接和施陶丁格連接。近年來,多肽液相片段合成發展迅速,在多肽和蛋白質合成行業取得了長足的進步。在多肽片段合成法中,多肽片段可以根據多肽片段的化學特定性或化學選擇性自發連接,獲得目標多肽。由于多肽片段中氨基酸殘留物較少,純度高,易于凈化。
多肽固相合成:人工固相合成多肽通常從序列的C端逐一向N端添加氨基酸。固拓生物多肽合成是Fmoc或Boc的多肽合成(兩種方法的合成過程是一樣的,只是α-去除氨基保護基的方法不同)。
以Fmoc保護策略法為例。生成由以下步驟組成:
①懸掛樹脂:根據訂單使用并稱相應量的樹脂,將其放入反應釜中增溶備用。
②保護:Fmoc保護柱和單個保護基團必須使用20%piperidine來清除氨基。
③檢驗:檢驗是否已清除保護基,是否已露出氨基。
④激活和交聯:下一種氨基酸的羧基被一種活性劑激活。活化的單一氨基反應與游離氨基反應交聯,產生肽鍵。需要注意的是,氨基酸的投入并不是隨意的。為了保證肽鏈合成的準確性;氨基酸、縮合劑和堿的比例。這里有一個參考比例。(規模(mol):氨基酸:堿=1:3:3:6)
⑤檢驗:檢驗所需氨基酸是否已連接。結果是陰性,判斷氨基酸已完全連接。
⑥循環:反復循環②-⑤直至生成完成。
⑦將合成的肽從樹脂切割和去保護。(Fmoc策略可以通過TFA(強酸)從樹脂上切除多肽。)固相合成肽鏈。為了減少副反應的產生,選擇的一些氨基酸側鏈由保護基團保護。但是最終的成品只需要肽鏈,需要去除保護基。一般為了操作方便,切割液是根據肽鏈上不同的保護基提前準備好的。
⑧使用冰乙醚離心沉淀(至少要洗三次);洗滌,冷凍干燥。通過MS檢測和HPLC檢測獲得粗品。
多肽的生物合成主要包括發酵和酶解。隨著生物工程技術的發展,DNA重組技術主導的基因工程方法也應用于多肽合成。
寫到最后:
杭州固拓生物科技有限公司定制多肽合成業務:藥物肽、臨床肽、訂書肽、淀粉肽、醛肽、環肽、二硫鍵搭橋多肽、穿膜肽、各種抗菌肽、美容肽、磷酸化肽、PEG肽、偶聯BSA和KLH抗原肽、各類酸修飾多肽、各種胺類化合物修飾多肽(苯胺、異戊胺、二乙胺)、各類榮光標記(FITC、FAM系列、DOTA、TAMRA系列、Cy系列)同位素肽等。固拓生物所有產品僅限科研使用,不得用于人體,如有違反,后果自負。
原創文章如有轉載,請注明出處“本文首發于固拓多肽合成生物科技有限公司(www.tianyunidc.com)”
本公司的所有產品僅用于科學研究或者工業應用等非醫療目的,不可用 于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用。
- 上一條:L-肌肽的作用與合成方法
- 下一條:酶與肽有什么區別?